Mae'r system RPA{0}}CRISPR/Cas12a yn yr astudiaeth hon yn cyflawni darganfyddiad HCMV cyflym (30–40 munud), ultra{-sensitif (1 copi/μL) drwy dargedu'r genyn UL123 cynnar, sy'n perfformio'n well na dulliau confensiynol mewn profion sampl clinigol. ac yn tanlinellu dichonoldeb diagnosteg sy'n seiliedig ar CRISPR ar gyfer gwella rheolaeth ar glefydau sy'n gysylltiedig â HCMV. Mae symlrwydd ac effeithlonrwydd y assay yn amlygu ei botensial fel pwynt-o-offeryn gofal ar gyfer gosodiadau cyfyngedig adnoddau.
Patrymau safleoedd mwyhau RPA a dewis cit.
(A) Dyluniad paent preimio RPA o ran lleoliad darnau ymhelaethu. Mae saethau'n nodi safleoedd y sylfaen o ddechrau i ddiwedd y darn chwyddedig gyda'r paent preimio P1-P6.
(B) Delwedd electrofforesis gel agarose o'r cynnyrch RPA wedi'i chwyddo gyda 6 set paent preimio HCMV.
(C) Sgrinio effeithlonrwydd mwyhau pecynnau RPA gan wahanol gwmnïau. P: Primer, NC: Rheolaeth Negyddol.
Roedd y canlyniadau'n dangos bod pecyn AmpFuture yn arddangos yr effeithlonrwydd ymhelaethu uchaf.
Cymhariaeth o gyfraddau positif MIRA-CRISPR/Cas12a, PCR - Dull Archwilio Fflwroleuol a qPCR mewn samplau clinigol.
Casglwyd samplau gwaed ac wrin gan 48 o gleifion clinigol. Echdynnwyd DNA genomig o'r samplau hyn gan ddefnyddio Pecyn DNA Genomig TIANamp, a dadansoddwyd canlyniadau canfod UL122 trwy'r dull stiliwr fflworoleuol PCR-. Wrth gymharu ein canlyniadau â diagnosis clinigol, nododd ein dulliau 6 sampl cadarnhaol a oedd yn negyddol mewn profion clinigol.
